酸棗粒種苗,大青棗苗用什么苗木稼接
發(fā)布時(shí)間:2022-08-20 05:18
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大青棗苗用什么苗木稼接還行吧酸棗是嫁接臺(tái)灣青棗的砧木。2,怎么種酸棗苗能打佛落靈嗎是氟樂靈,是選擇性芽前土壤處理劑,易揮發(fā)、易光解、水溶劑極小,不易在土層中移動(dòng)。主要通過雜草的胚芽鞘與胚軸吸收。對(duì)……
1,大青棗苗用什么苗木稼接
2,怎么種酸棗苗能打佛落靈嗎
是氟樂靈,是選擇性芽前土壤處理劑,易揮發(fā)、易光解、水溶劑極小,不易在土層中移動(dòng)。主要通過雜草的胚芽鞘與胚軸吸收。對(duì)已出土雜草無效。對(duì)禾本科和部分小粒種子的闊葉雜草有效,持效期長(zhǎng)。 只要酸棗苗已出土,可以進(jìn)行土壤處理。
3,藥用植物離體培養(yǎng)再生植株是什么
(孫國(guó)棟)一、培養(yǎng)再生植株的意義以植物組織培養(yǎng)為主要手段的植物生物技術(shù),包括五個(gè)分支領(lǐng)域,即用離體技術(shù)改良植物品種,經(jīng)濟(jì)植物的快速繁殖,超低溫種質(zhì)保存,植物細(xì)胞的大量培養(yǎng)和植物遺傳工程。在藥用植物離體培養(yǎng)中,除了植物細(xì)胞的大量培養(yǎng)外,其余都涉及到再生植株的培養(yǎng)。和一般的植物不同,培養(yǎng)藥用植物再生植株需要注意藥用成分的變化。(一)快速繁殖通過離體技術(shù)大量培養(yǎng)再生植株可以達(dá)到快速繁殖的目的,主要用于:(1)自然繁殖率低的植物;(2)性狀不一致的雜合植物,(3)資源稀少的瀕危植物;(4)新培育的優(yōu)良品種;(5)優(yōu)良芽變品種和性狀好的優(yōu)選單株;(6)國(guó)外引入的少量植物材料;(7)育種過程中需要迅速擴(kuò)大的某些自交系、原始材料、雜種子代;(8)組織培養(yǎng)或自然條件下獲得的三倍體與多倍體植物;(9)除去病原菌(真菌、細(xì)菌、病毒)的植物。快速繁殖技術(shù)能否應(yīng)用取決于:(1)培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)易、穩(wěn)定、完善;(2)成本低于常規(guī)方法;(3)具有一定的設(shè)備條件和技術(shù)力量;(4)市場(chǎng)需要,價(jià)格適宜。如羅漢果、石斛。(二)脫毒植株通過莖尖培養(yǎng),或者通過花瓣培養(yǎng)和愈傷組織長(zhǎng)期培養(yǎng),獲得除去主要病毒的脫毒植株,用它作為母株繼續(xù)繁殖,可以得到大量無病毒種苗,用于大田生產(chǎn),可以提高產(chǎn)量和質(zhì)量,防止品種退化。如地黃、菊花。(三)種質(zhì)保存在4℃低溫或在液氮的低溫中,植物組織和細(xì)胞的生活力可以長(zhǎng)期保持。可用于冷凍保存的植物材料有:(1)莖尖和側(cè)生分生組織;(2)培養(yǎng)的植物細(xì)胞和胚狀體;(3)原生質(zhì)體;(4)植物器官,如胚、胚乳、子房、花藥、花粉和種子等。冷凍保存植物材料,可以節(jié)省人力、地力和物力。便于地區(qū)間和國(guó)際間種質(zhì)交流,通過試管繁殖提供育種的原始材料和無病毒種苗。(四)品種改良用離體技術(shù)改良植物品種的方法主要有:(1)通過花藥、花粉、未受精子房、胚珠等培養(yǎng)獲得單倍體植株,進(jìn)行單倍體育種;(2)通過胚乳培養(yǎng)獲得三倍體植株,或在植物組織培養(yǎng)中,通過秋水仙或其它因素處理獲得多倍體植株;(3)通過體細(xì)胞無性系變異和細(xì)胞突變體篩選,以獲得具有優(yōu)良性狀的變異體和突變體;(4)原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞雜交。不論采用何種育種技術(shù),都必須誘導(dǎo)再生植株,并對(duì)后代進(jìn)行鑒定。如人參、枸杞。(五)植物基因工程植物基因工程包括基因分離、載體系統(tǒng)和受體系統(tǒng)三個(gè)組成部分。它直接用控制性狀遺傳的基因作為操作對(duì)象,可以更精確地定向改良品種,目前分離和克隆的基因有20余種。載體系統(tǒng)主要在研究膿桿菌的Ti質(zhì)粒系統(tǒng)(agrobacterium tumerfaciens T-DNA)。作為受體系統(tǒng),可以采用原生質(zhì)體,懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,愈傷組織離體的植物器官或整體植株。無論采用何種受體系統(tǒng),都必須使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞再生為完整植物,植株再生是植物基因工程的一個(gè)主要環(huán)節(jié)。如龍葵、菘藍(lán)。二、植株再生的基本原理生物界普遍存在再生現(xiàn)象,生物再生是自然選擇和人工選擇的結(jié)果。通常低等生物具有較強(qiáng)的再生能力,神經(jīng)系統(tǒng)愈發(fā)達(dá)的高等動(dòng)物,再生能力愈弱。在植物中,細(xì)胞、組織和器官,在離體培養(yǎng)條件下,可以生長(zhǎng)和發(fā)育,形成完整植株。但是,不同種植物,或者同種植物不同品種,甚至同一植物不同組織和器官的細(xì)胞,再生能力也有差別。通常野生植物比栽培植物再生能力強(qiáng),無性繁殖的植物強(qiáng)于種子繁殖的植物。植株再生的基礎(chǔ)在于細(xì)胞具有遺傳全能性,即每一個(gè)細(xì)胞含有產(chǎn)生一個(gè)完整有機(jī)體的全部遺傳信息,在適當(dāng)?shù)臈l件下,一個(gè)具有全能性的活細(xì)胞,其發(fā)育和分化,受其DNA上面的部分基因的被活化或阻抑所控制,一個(gè)細(xì)胞可以形成一個(gè)完全新的有機(jī)體。在離體培養(yǎng)物上再生植株,是離體培養(yǎng)物的細(xì)胞在各種環(huán)境因子的刺激和作用下,經(jīng)過脫分化和再分化的結(jié)果。可能由于植物細(xì)胞分化狀況僅有相對(duì)的穩(wěn)定性,在離體培養(yǎng)中,特異化的細(xì)胞比較容易經(jīng)脫分化恢復(fù)全能性,全能性的脫分化細(xì)胞經(jīng)過再分化,產(chǎn)生完整的小植株。其中分化是植株再生的中心問題,和許多因素有關(guān)。植物激素是化學(xué)信使,作為基因表達(dá)的“效應(yīng)子”,對(duì)RNA和蛋白質(zhì)的合成起直接影響,在細(xì)胞脫分化和再分化的過程中起著重要的、有時(shí)是決定性的作用。雖然許多問題還非常不清楚,但是,植株再生的基本原理,目前認(rèn)為是:(1)植物細(xì)胞全能性;(2)植物細(xì)胞的脫分化和再分化;(3)植物激素的平衡作用。這些基本原理,既是組織培養(yǎng)的一般指導(dǎo)原則,也是一些有待于深入研究的基本理論課題。三、植株再生的基本途徑從離體培養(yǎng)物上再生植株,存在兩條形態(tài)發(fā)生的基本途徑,即器官發(fā)生和胚胎發(fā)生。這兩種形態(tài)發(fā)生,有的經(jīng)過愈傷組織階段,有的則直接產(chǎn)生于離體的母體組織。(一)器官發(fā)生器官發(fā)生途徑是通過器官分化形成完整植株,如貝母、藏紅花、紫背天葵、蘆薈。離體培養(yǎng)物的器官分化,包括不定芽、不定根、鱗莖、球莖、塊莖、原球莖以及花的形成。通過不定芽和不定根形成再生植株,有三種方式:(1)先形成芽,而后在芽上產(chǎn)生根;(2)先形成根,而后在根上產(chǎn)生芽;(3)在愈傷組織上同時(shí)產(chǎn)生芽和根,以后芽和根之間形成維管系統(tǒng),連結(jié)成統(tǒng)一的軸狀結(jié)構(gòu)。大多數(shù)情況為第一種方式。通過鱗莖、球莖、塊莖、原球莖等器官分化,也有不同情形。在植物組織培養(yǎng)中,雖然通過器官發(fā)生途徑再生植株的研究報(bào)道很多,但是有關(guān)基礎(chǔ)研究的資料仍很貧乏。大多數(shù)的研究繼續(xù)集中在外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件這三類因子調(diào)控作用的經(jīng)驗(yàn)性操作。在大多數(shù)情況下,人們僅能觀察已經(jīng)表現(xiàn)出來的分化狀態(tài),而很難跟蹤分化的過程。與形態(tài)發(fā)生的起源和方向有關(guān)的因素,目前的認(rèn)識(shí)還很模糊,在這些因素中,包括有離體培養(yǎng)體系中各類物質(zhì)的變化和相互作用,這些物質(zhì)來自培養(yǎng)基、外植體及其培養(yǎng)過程中的代謝產(chǎn)物。在離體培養(yǎng)中,只有少量的細(xì)胞被啟動(dòng),而且起始是不同步的。Torrey(1966)提出擬分生組織假說,形態(tài)發(fā)生起始于愈傷組織中形成的分生細(xì)胞團(tuán),即擬分生組織。在培養(yǎng)體系內(nèi)各種因子的作用下,由擬分生組織產(chǎn)生不同的原基,由于作用因子的性質(zhì)不同,或者形成根,或者形成芽,或者發(fā)育為胚狀體。擬分生組織可能發(fā)生于組織與培養(yǎng)基的界面,其形成部位可能決定于從培養(yǎng)基向組織擴(kuò)散的物質(zhì)造成的生理梯度。Skoog和Miller等提出激素平衡假說,認(rèn)為器官分化和細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比例有關(guān)。在大多數(shù)情況下,生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的高比值,利于根形成,而相反的比值利于芽的發(fā)生。由于外植體內(nèi)源激素的存在和抑制物質(zhì)的累積,也有不少相反的情況。在實(shí)際應(yīng)用這一原則時(shí),有時(shí)需要增加或省略某一類植物激素,對(duì)下述因素作出必要的考慮:(1)植物激素的種類和組合;(2)植物激素的絕對(duì)濃度;(3)植物激素,主要是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例;(4)植物激素的順序效應(yīng);(5)其它因素的影響,如外植體、營(yíng)養(yǎng)條件、碳源種類和濃度以及其它理化因素。(二)胚胎發(fā)生從胚胎發(fā)生途徑再生植株是先形成胚狀體,通過胚狀體萌發(fā)而形成完整的小植株。在高等植物中胚狀體的發(fā)生是一個(gè)普遍現(xiàn)象,現(xiàn)在已觀察到40多科150多種植物具有胚胎發(fā)生能力。關(guān)于胚狀體的概念,朱澂提出(1978),胚狀體是植物組織培養(yǎng)中起源于非合子細(xì)胞,經(jīng)過胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過程形成的胚狀結(jié)構(gòu)。這個(gè)定義包括下列幾點(diǎn)含義:(1)胚狀體是組織培養(yǎng)的產(chǎn)物,只限于在組織培養(yǎng)范圍內(nèi)使用,區(qū)別于無融合生殖的胚;(2)胚狀體起源于非合子細(xì)胞,區(qū)別于合子胚;(3)胚狀體的形成經(jīng)歷胚胎發(fā)育的過程,區(qū)別于組織培養(yǎng)中分化的芽體。胚狀體的來源可以分為五類:(1)組織器官;(2)愈傷組織;(3)游離單細(xì)胞;(4)小孢子;(5)原生質(zhì)體。其中有的起源于單細(xì)胞,有的起源于多細(xì)胞。胚狀體發(fā)生方式有兩種(Sharp et al,1980):(1)直接發(fā)生:胚狀體形成不經(jīng)過愈傷組織,直接來自離體培養(yǎng)組織中預(yù)決定胚性細(xì)胞(Preembryogenic determined cell);(2)間接發(fā)生:胚狀體發(fā)生經(jīng)過愈傷組織,從愈傷組織的誘導(dǎo)決定胚性細(xì)胞(Induced-embryogenic determined cell)發(fā)育而成。在培養(yǎng)體系有關(guān)因子的作用下,胚性細(xì)胞不斷分裂和增殖,形成胚性細(xì)胞團(tuán),進(jìn)而發(fā)育成球形胚。通常胚性細(xì)胞較小,核大,細(xì)胞質(zhì)濃厚,富有大的淀粉粒。球形胚組織可以與周圍組織分離,和合子胚發(fā)育過程相似,由球形胚發(fā)育分化為心形胚、魚雷形胚和具有子葉的成熟胚狀體。成熟的胚狀體形態(tài)和合子胚相似,具有胚根、胚芽和子葉。在分化培養(yǎng)基上,胚狀體像種子一樣萌發(fā),胚軸伸長(zhǎng),葉片展開,發(fā)育根和形成葉綠素,多種器官再進(jìn)一步生長(zhǎng)形成小植株。由于胚狀體的形成,導(dǎo)致了人工種子的研制。從胚狀體發(fā)生到植株形成是一個(gè)連續(xù)過程,可以分為三個(gè)連續(xù)階段:(1)胚狀體的起源;(2)胚狀體的分化;(3)胚狀體萌發(fā)生長(zhǎng),形成小植株。在實(shí)際操作中,胚性細(xì)胞的誘導(dǎo)及其形成胚狀體的發(fā)育過程,可能在同一個(gè)培養(yǎng)基上形成,或者分別需要經(jīng)過兩次培養(yǎng)。胚狀體形成綠色植株,則需要轉(zhuǎn)至分化培養(yǎng)基。如果培養(yǎng)基中的化學(xué)物質(zhì),主要是植物激素的不平衡。胚性細(xì)胞的分化和胚狀體的發(fā)育會(huì)受到抑制,而發(fā)生畸形胚性組織塊。這些畸形結(jié)構(gòu)也可能具有胚胎發(fā)生潛力。胚胎發(fā)生與植物激素的關(guān)系因植物而異,可有幾種類型:1.專一性生長(zhǎng)素型胚胎發(fā)生必須有生長(zhǎng)素存在,其它植物激素的存在起抑制作用。這種類型又有兩種情況:(1)誘導(dǎo)胚性細(xì)胞必須有生長(zhǎng)素,胚狀體形成和發(fā)育,則需要降低或者去除生長(zhǎng)素,如胡蘿卜;(2)胚狀體誘導(dǎo)和發(fā)育可在同一生長(zhǎng)素培養(yǎng)基上進(jìn)行。如人參。2.非專一性生長(zhǎng)素型胚胎發(fā)生需要生長(zhǎng)素,其它植物激素,如細(xì)胞分裂素、赤霉素或脫落酸,在一定配比下有協(xié)同作用,如酸棗。3.非生長(zhǎng)素型胚胎發(fā)生不需要生長(zhǎng)素,可在細(xì)胞分裂素培養(yǎng)基上形成,如檀香。4.非激素型胚胎發(fā)生不需要植物激素,如曼陀羅花藥培養(yǎng)。胚狀體分化綠苗,通常需要降低或去除生長(zhǎng)素,而細(xì)胞分裂素、赤霉素具有主要作用,如人參、西洋參。在體細(xì)胞胚胎發(fā)生中,還原態(tài)氮化物具有重要作用。還原態(tài)氮化物包括無機(jī)氮,如NH+4;有機(jī)氮化物,如氨基酸、酰胺、水解酪蛋白等。在通常情況下,還原態(tài)氮化物有利于胚狀體的發(fā)生,但是作用機(jī)理并不清楚,不同植物反應(yīng)也不相同。許多研究表明,生長(zhǎng)素和還原態(tài)氮化物的濃度比例可能起著重要作用。不同植物不同離體培養(yǎng)物再生植株的途徑可能不同,有的主要通過器官發(fā)生途徑,如煙草,有的很容易發(fā)生胚狀體,如胡蘿卜。但是許多植物再生植株,既可以通過器官發(fā)生途徑,也可以通過胚胎發(fā)生途徑,植物激素可以進(jìn)行調(diào)控,如人參、西洋參等。通常誘導(dǎo)芽體分化需要細(xì)胞分裂素,誘導(dǎo)胚狀體發(fā)生則生長(zhǎng)素起重要作用。在離體培養(yǎng)物上分化芽體和胚狀體,它們的主要區(qū)別在于:芽體具有單極性,與離體培養(yǎng)物有維管組織聯(lián)系,根和芽不同時(shí)產(chǎn)生;胚狀體具兩極性,即有根端(胚根)和莖端(胚芽),與離體培養(yǎng)物無直接聯(lián)系,是一個(gè)完整的植物體雛形。由于體細(xì)胞胚胎發(fā)生研究的進(jìn)展,導(dǎo)致了人工種子的研制。四、植株再生的限制因素(一)植株再生的限制因素在離體培養(yǎng)物上再生植株,可以分為外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件三類調(diào)控因子。在這三類因子中,雖然它們的作用都很重要,但是比較起來,植株再生能否成功,限制因素主要不在于培養(yǎng)基,而在于培養(yǎng)材料本身,即培養(yǎng)材料細(xì)胞全能性的表達(dá)程度。1.遺傳型(基因型)的影響不同植物種之間再生能力有很大差別,有的再生能力很強(qiáng),如茄科、傘形科、十字花科等;有的再生比較困難,如豆科植物。同一種植物不同品種再生能力也有不同。由于遺傳型的影響,決定了植株再生的難易程度和應(yīng)用前景。我們?cè)谘芯课寮涌扑幱弥参锶藚?、西洋參、三七和刺五加種胚培養(yǎng)再生植株時(shí),得到下述結(jié)果:(1)在附加BA2mg/l+NAA0.5mg/l的培養(yǎng)基上,人參和西洋參種胚培養(yǎng)物可以直接啟動(dòng)芽分化,轉(zhuǎn)入含有赤霉素的培養(yǎng)基上則形成不定芽,而三七和刺五加則無芽體分化。(2)在有生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上,這四種藥用植物種胚培養(yǎng)物上均有胚狀體發(fā)生,但是對(duì)生長(zhǎng)素的種類和濃度反應(yīng)不同。在附加2,4-D0.5—1.0mg/l時(shí),胚胎發(fā)生能力依次為:西洋參>人參>刺五加,而三七未觀察到胚胎發(fā)生。在含有IAA的培養(yǎng)基上,高濃度的IAA促進(jìn)人參種胚體細(xì)胞胚胎發(fā)生,而三七和刺五加則以低濃度IAA為宜。(3)在上述的生長(zhǎng)素條件下,人參和西洋參為間接胚胎發(fā)生,而三七和刺五加為直接胚胎發(fā)生。2.外植體的來源在離體培養(yǎng)中,可用作培養(yǎng)的材料很多,包括器官、組織,甚至單細(xì)胞。雖然植物細(xì)胞具有全能性,但它的表達(dá)可能僅限于某些特殊的細(xì)胞,這些細(xì)胞可能預(yù)先存在于外植體中,或者產(chǎn)生于培養(yǎng)過程之中。許多實(shí)驗(yàn)表明,培養(yǎng)材料的特性,不僅影響再生的可能性,而且影響植株增長(zhǎng)速率和植株的品質(zhì)。在選用培養(yǎng)材料時(shí)可以觀察到,分生組織易于分化,子葉基部再生較強(qiáng),成年樹木的葉片,可能逆轉(zhuǎn)性較差,細(xì)胞全能性難以表達(dá)。我們?cè)谘芯课餮髤㈦x體培養(yǎng)再生植株時(shí),不同外植體來源的愈傷組織,細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同(表13—10)。表13—10 西洋參不同外植體愈傷組織細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度3.外植體的狀況外植體的發(fā)育階段和年齡,外植體內(nèi)源激素和生理狀態(tài)(取材季節(jié)),外植體大小,外植體的預(yù)處理,以及母體植株的質(zhì)量等均影響植株再生的能否成功。在選擇外植體時(shí),需要了解植物的生物學(xué)特性。(二)外植體的種類和選用在離體培養(yǎng)中,可供外植體的材料多種多樣,可以根據(jù)研究目的、再生途徑和實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行選用。1.帶芽的外植體包括莖頭、側(cè)芽、原球莖、鱗莖等,這類外植體產(chǎn)生的植株成功率較高,變異性較小,容易保持材料的優(yōu)良特性,通常用于快速繁殖和培養(yǎng)無病毒植株(莖尖培養(yǎng))。在培養(yǎng)時(shí),為了誘導(dǎo)莖軸伸長(zhǎng),在培養(yǎng)基中多附加有生長(zhǎng)素和赤霉素;如果誘導(dǎo)腋芽生長(zhǎng)以產(chǎn)生叢生芽,在培養(yǎng)基中常含有大量的細(xì)胞分裂素。2.由分化的組織構(gòu)成的外植體包括莖段、葉片、根等營(yíng)養(yǎng)器官;花莖、花瓣、花萼、花藥、子房,胚珠、果實(shí)等生殖器官。這類外植體在培養(yǎng)過程中通常形成愈傷組織,通過器官發(fā)生和胚胎發(fā)生途徑再生植株。通過器官發(fā)生途徑再生植株,通常選用在自然條件下能產(chǎn)生不定芽的器官組織,這要根據(jù)不同植物的特性加以選擇,例如蘆薈選用莖段,菊花選用花瓣,百合選用鱗片等。通過胚胎發(fā)生途徑,常選用胚、幼嫩花序、分生組織等作外植體。這類外植體再生植株變異性較大,可用于無性系變異和突變體篩選,或者用于單倍體育種,如花粉植株。3.由遺傳轉(zhuǎn)化的細(xì)胞構(gòu)成的外植體主要是指冠癭瘤轉(zhuǎn)化系統(tǒng)和直接DNA轉(zhuǎn)化系統(tǒng),用于植物遺傳工程。五、再生植株的培養(yǎng)方法(一)再生植株的培養(yǎng)步驟1.建立無菌培養(yǎng)物這一步驟包括選取外植體,材料表面滅菌和在培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)。能否得到無菌培養(yǎng)物,首先決定于植物材料的狀況,應(yīng)盡可能使用在培養(yǎng)室或溫室栽種的生長(zhǎng)健康旺盛的材料。田間材料滅菌比較困難,常采用下述方法:(1)用抗菌素溶液和殺菌劑預(yù)處理植株;(2)用塑料袋包裹枝條;(3)采回枝條扦插,利用新生的芽;(4)對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行多次滅菌。有一些植物的外植體在接種后和培養(yǎng)過程中發(fā)生褐變,可以選用一些抗氧化劑、解毒劑或吸附劑加入到培養(yǎng)基中,如檸檬酸、抗壞血酸,及半胱氨酸、聚乙烯吡咯烷酮、二硫蘇糖醇、促長(zhǎng)啉、氯胺丁、二乙基二硫代氨基甲酸酯、活性炭等,以改善褐變情況。2.愈傷組織的培養(yǎng)愈傷組織是植物組織培養(yǎng)中最常遇到的一個(gè)階段,為了快速繁殖遺傳性一致的優(yōu)良株系,使變異小于3%,需要盡量避免愈傷組織,然而在品種改良方面,誘導(dǎo)愈傷組織是有益的。愈傷組織通常產(chǎn)生于外植體傷口的表層細(xì)胞。愈傷組織的生長(zhǎng)特性取決于植物材料、培養(yǎng)基和環(huán)境條件,從外植體到愈傷組織建立,大體上經(jīng)歷誘導(dǎo)、細(xì)胞分裂和分化階段。在外界條件尤其是植物激素的作用下,少數(shù)細(xì)胞被啟動(dòng),新陳代謝加強(qiáng),而進(jìn)入活躍的細(xì)胞分裂,外植體細(xì)胞逆轉(zhuǎn)為分生組織,或脫分化為愈傷組織。愈傷組織的生長(zhǎng)沒有明顯的極性,只有內(nèi)外的生長(zhǎng)陡度,外圍的細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)快于內(nèi)部細(xì)胞。第三個(gè)時(shí)期,愈傷組織出現(xiàn)細(xì)胞分化和產(chǎn)生某些次生代謝產(chǎn)物。愈傷組織最重要的特征是可以通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生形成根、芽和胚狀體,進(jìn)而形成小植株。愈傷組織通常表現(xiàn)為淡黃色、白色、綠色,有的含有花色素苷形成的顏色。愈傷組織有松散型和緊密型。同一來源的愈傷組織,在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過人工篩選,可以得到不同的細(xì)胞系,它們?cè)诩?xì)胞分化程度、顏色、生長(zhǎng)速度、對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件和激素條件的要求、合成特殊物質(zhì)的能力等方面有很大的差異。變異是愈傷組織另一個(gè)重要特征。這些變異有表現(xiàn)型變異和基因型變異?;蛐妥儺惪赡苡斜缎宰兓旧w畸變、基因序列變化。通過對(duì)有益變異的選擇可以用于品種改良。從外植體形成愈傷組織,與植物激素的關(guān)系大致有下述情況:(1)僅需要生長(zhǎng)素;(2)僅需要細(xì)胞分裂素;(3)需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素;(4)不需要植物激素。在大多數(shù)情況下,生長(zhǎng)素是誘導(dǎo)愈傷組織的主要因子。在培養(yǎng)過程中,由于營(yíng)養(yǎng)逐漸耗盡,瓊脂失水逐漸變干,代謝產(chǎn)物累積而使毒性提高,愈傷組織培養(yǎng)一段時(shí)間需要轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng),在固體培養(yǎng)基上,一般4—6周繼代培養(yǎng)一次。轉(zhuǎn)移的培養(yǎng)體,大約5—10mm,重20—100mg左右(Street,1969)。體積太小可能生長(zhǎng)很慢,或者不生長(zhǎng),但是在進(jìn)行抗性篩選時(shí),培養(yǎng)體體積要小些。愈傷組織繼代培養(yǎng)基和脫分化培養(yǎng)基的成分和激素條件,可能相同,也可能不同,因植物而異。由于長(zhǎng)期繼代培養(yǎng)使內(nèi)源激素含量增加,繼代培養(yǎng)基的激素種類和含量需要作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。3.無性系的建立從離體培養(yǎng)物上建立無性系,經(jīng)常遇到變異、細(xì)胞分化能力喪失和出現(xiàn)玻璃苗等問題。對(duì)每一種植物的離體培養(yǎng),需要通過大量的試驗(yàn),確定最佳培養(yǎng)條件,使之程序化,以便達(dá)到應(yīng)用目的。建立無性系的途徑大致可用圖13—2表示。圖13—2 無性系建立示意圖4.生根從芽和嫩枝誘導(dǎo)生根的難易程度首先取決于植物的遺傳型。草本植物一般比木本植物容易。成年樹產(chǎn)生的芽和嫩枝,比幼態(tài)樹的生根困難。誘導(dǎo)生根通常在生根培養(yǎng)基上加入適量的生長(zhǎng)素,如萘乙酸、吲哚丁酸、吲哚乙酸。有些植物可以在無激素培養(yǎng)基上生根。生根培養(yǎng)基可以和前培養(yǎng)基相同,也經(jīng)常使用1/2、1/3或1/4濃度的高鹽培養(yǎng)基,或者總鹽濃度較低的培養(yǎng)基。鐵鹽有益于根的形成,一般維持原濃度。蔗糖對(duì)于生根是必要的,不同的植物需要量可能不同。一些難以生根的植物可以試用一些其它的方法:(1)用高濃度生長(zhǎng)素溶液預(yù)處理若干小時(shí),而后用無菌水洗凈接入無激素培養(yǎng)基;(2)使用濾紙橋或蛭石代替瓊脂作支持物誘導(dǎo)生根;(3)在生根培養(yǎng)基上添加一些附加物,如活性炭、B9、二甲亞砜、根皮苷、根皮酚等物質(zhì);(4)在試管中誘導(dǎo)休眠器官,如小塊莖、小球莖、地下莖等;(5)切割嫩枝直接進(jìn)行扦插或水培等。5.移栽有的植物移栽比較容易,例如:蘆薈試管苗直接移入土中,成活率可達(dá)100%,而人參試管苗移栽目前尚未見有成功的報(bào)道。對(duì)于許多植物需要具體研究其特殊的移栽技術(shù)。(1)培養(yǎng)壯苗,移栽前進(jìn)行鍛煉。(2)逐步過渡,先經(jīng)過人工基質(zhì),如蛭石、砂粒、珍珠巖、焦渣、心土等,而后移入土壤。對(duì)于易感病的植物,人工基質(zhì)可采用高溫滅菌、化學(xué)滅菌或藥劑滅菌。(3)選擇合適的移栽時(shí)期。許多木本植物和一部分草本植物,當(dāng)根原基突起或形成幾毫米短根時(shí)移栽成活率最高。有的草本植物可進(jìn)行二次生根誘導(dǎo),在第一次生根老化后再誘導(dǎo)新根進(jìn)行移栽。(4)控制移栽環(huán)境條件,保持高濕度和良好通風(fēng),避免陽(yáng)光直射和溫度過大波動(dòng)。有些植物需要模擬其生態(tài)環(huán)境。(5)病害及時(shí)防治。常見為立枯病,可用多菌靈等農(nóng)藥對(duì)幼苗和基質(zhì)進(jìn)行定期噴灑。(6)進(jìn)行試管苗嫁接。(二)培養(yǎng)基和環(huán)境條件1.培養(yǎng)基根據(jù)培養(yǎng)材料和培養(yǎng)目的,植物組織培養(yǎng)可以分為許多種類,如器官培養(yǎng),莖尖培養(yǎng),花藥和花粉培養(yǎng),子房和胚珠培養(yǎng),胚胎培養(yǎng),胚乳培養(yǎng),果實(shí)培養(yǎng),細(xì)胞懸浮培養(yǎng),分生組織培養(yǎng),愈傷組織培養(yǎng),原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞融合等。不同植物不同種類的組織培養(yǎng)需要選用不同的培養(yǎng)基。目前可供植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基約有250余種。對(duì)于一般的試管繁殖,為了降低生產(chǎn)成本,有的采用簡(jiǎn)化培養(yǎng)基,用食用糖代替試劑用蔗糖,用普通水代替蒸餾水配制培養(yǎng)基。靜置淺層液體培養(yǎng)比瓊脂固體培養(yǎng)可降低成本70—80%,目前已用于一些植物的快速繁殖。2.環(huán)境條件包括培養(yǎng)基酸堿度,培養(yǎng)溫度、光照條件和通氣條件等。一般植物組織生長(zhǎng)的最適pH在5—6.5之間,固體培養(yǎng)基常用pH5.8,液體培養(yǎng)基常用pH5.0。培養(yǎng)溫度一般為20—28℃左右。高溫(大約為27℃)適合于熱帶品種,低溫(20℃左右)有利于高山植物的離體培養(yǎng)。在試管內(nèi)形成鱗莖球莖、塊莖等休眠器官時(shí),其萌發(fā)常需要低溫處理。愈傷組織培養(yǎng)一般可在暗中進(jìn)行。對(duì)于光自養(yǎng)離體培養(yǎng)物培養(yǎng)、器官發(fā)育和植株形成需要光照。光照強(qiáng)度范圍300—10000lx,一般1000—3000lx。一般培養(yǎng)室可設(shè)計(jì)用自然光代替日光燈。一些研究表明,不同波長(zhǎng)的彩色光對(duì)愈傷組織的建成和器官的分化表現(xiàn)一定的影響,而且隨植物種類和器官不同而異。光照時(shí)間因植物特性和實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?,可連續(xù)光照,或周期性光照10—16小時(shí)。塊莖和其它貯藏器官的形成可能需要較長(zhǎng)的黑暗時(shí)期。研究花器官發(fā)生時(shí)需要根據(jù)植物特性控制光照時(shí)間。在固體培養(yǎng)基上通??梢圆豢紤]空氣成分,雖然在培養(yǎng)過程中有乙烯產(chǎn)生。液體培養(yǎng)需要注意通氣。細(xì)胞懸浮培養(yǎng)一般采用振蕩法通氣。在器官分化時(shí),可用轉(zhuǎn)床,使組織能間隔在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。小體積的靜置淺層液體培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間需要縮短,大約四周繼代培養(yǎng)一次。為了保存繁殖材料,仍應(yīng)采用固體培養(yǎng)。六、我國(guó)藥用植物離體培養(yǎng)再生植株研究概況在藥用植物栽培生產(chǎn)中,不少名貴藥用植物生長(zhǎng)周期長(zhǎng),用常規(guī)育種需要很長(zhǎng)時(shí)間,如人參、黃連等。有的藥用植物繁殖系數(shù)小,耗種量大,如貝母、番紅花等。有的因病毒為害而退化,影響產(chǎn)量和質(zhì)量,如地黃、太子參等。一些價(jià)格昂貴的野生藥用植物資源極少,生長(zhǎng)緩慢,如黑節(jié)草、霍山石斛等。一些進(jìn)口南藥因種苗奇缺而影響擴(kuò)大生產(chǎn),如乳香、血竭等。為了應(yīng)用植物生物技術(shù)對(duì)藥用植物進(jìn)行品種改良、快速繁殖、種質(zhì)保存和開展遺傳工程研究,藥用植物離體培養(yǎng)再生植株的研究和應(yīng)用日益引起人們的興趣和重視。目前,離體培養(yǎng)的試管藥用植物已達(dá)百種以上,如:爵床科九頭獅子草(Peristrophe japonica),獼猴桃科中華獼猴桃(Actinidia chinensis)、中華獼猴變種(A.chinensis var.sp.)、硬毛獼猴桃(A.chinensis var.hispide)夾竹桃科長(zhǎng)春花(Catharanthus roseus)、夾竹桃(Nerium indicum)、蛇根木(Rauwolfia serpertina),五加科刺五加(Acanthopanax senticosus)、人參(Panax ginseng)、竹節(jié)參(P.japonicus)、西洋參(P.quinquefolium)、三七(P.notoginseng),蘿摩科馬利筋(Asclepias curassavica)、印度娃兒藤(
4,野酸棗的經(jīng)濟(jì)價(jià)值有多高怎樣人工培育
(孫國(guó)棟)一、培養(yǎng)再生植株的意義以植物組織培養(yǎng)為主要手段的植物生物技術(shù),包括五個(gè)分支領(lǐng)域,即用離體技術(shù)改良植物品種,經(jīng)濟(jì)植物的快速繁殖,超低溫種質(zhì)保存,植物細(xì)胞的大量培養(yǎng)和植物遺傳工程。在藥用植物離體培養(yǎng)中,除了植物細(xì)胞的大量培養(yǎng)外,其余都涉及到再生植株的培養(yǎng)。和一般的植物不同,培養(yǎng)藥用植物再生植株需要注意藥用成分的變化。(一)快速繁殖通過離體技術(shù)大量培養(yǎng)再生植株可以達(dá)到快速繁殖的目的,主要用于:(1)自然繁殖率低的植物;(2)性狀不一致的雜合植物,(3)資源稀少的瀕危植物;(4)新培育的優(yōu)良品種;(5)優(yōu)良芽變品種和性狀好的優(yōu)選單株;(6)國(guó)外引入的少量植物材料;(7)育種過程中需要迅速擴(kuò)大的某些自交系、原始材料、雜種子代;(8)組織培養(yǎng)或自然條件下獲得的三倍體與多倍體植物;(9)除去病原菌(真菌、細(xì)菌、病毒)的植物??焖俜敝臣夹g(shù)能否應(yīng)用取決于:(1)培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)易、穩(wěn)定、完善;(2)成本低于常規(guī)方法;(3)具有一定的設(shè)備條件和技術(shù)力量;(4)市場(chǎng)需要,價(jià)格適宜。如羅漢果、石斛。(二)脫毒植株通過莖尖培養(yǎng),或者通過花瓣培養(yǎng)和愈傷組織長(zhǎng)期培養(yǎng),獲得除去主要病毒的脫毒植株,用它作為母株繼續(xù)繁殖,可以得到大量無病毒種苗,用于大田生產(chǎn),可以提高產(chǎn)量和質(zhì)量,防止品種退化。如地黃、菊花。(三)種質(zhì)保存在4℃低溫或在液氮的低溫中,植物組織和細(xì)胞的生活力可以長(zhǎng)期保持??捎糜诶鋬霰4娴闹参锊牧嫌校海?)莖尖和側(cè)生分生組織;(2)培養(yǎng)的植物細(xì)胞和胚狀體;(3)原生質(zhì)體;(4)植物器官,如胚、胚乳、子房、花藥、花粉和種子等。冷凍保存植物材料,可以節(jié)省人力、地力和物力。便于地區(qū)間和國(guó)際間種質(zhì)交流,通過試管繁殖提供育種的原始材料和無病毒種苗。(四)品種改良用離體技術(shù)改良植物品種的方法主要有:(1)通過花藥、花粉、未受精子房、胚珠等培養(yǎng)獲得單倍體植株,進(jìn)行單倍體育種;(2)通過胚乳培養(yǎng)獲得三倍體植株,或在植物組織培養(yǎng)中,通過秋水仙或其它因素處理獲得多倍體植株;(3)通過體細(xì)胞無性系變異和細(xì)胞突變體篩選,以獲得具有優(yōu)良性狀的變異體和突變體;(4)原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞雜交。不論采用何種育種技術(shù),都必須誘導(dǎo)再生植株,并對(duì)后代進(jìn)行鑒定。如人參、枸杞。(五)植物基因工程植物基因工程包括基因分離、載體系統(tǒng)和受體系統(tǒng)三個(gè)組成部分。它直接用控制性狀遺傳的基因作為操作對(duì)象,可以更精確地定向改良品種,目前分離和克隆的基因有20余種。載體系統(tǒng)主要在研究膿桿菌的Ti質(zhì)粒系統(tǒng)(agrobacterium tumerfaciens T-DNA)。作為受體系統(tǒng),可以采用原生質(zhì)體,懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,愈傷組織離體的植物器官或整體植株。無論采用何種受體系統(tǒng),都必須使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞再生為完整植物,植株再生是植物基因工程的一個(gè)主要環(huán)節(jié)。如龍葵、菘藍(lán)。二、植株再生的基本原理生物界普遍存在再生現(xiàn)象,生物再生是自然選擇和人工選擇的結(jié)果。通常低等生物具有較強(qiáng)的再生能力,神經(jīng)系統(tǒng)愈發(fā)達(dá)的高等動(dòng)物,再生能力愈弱。在植物中,細(xì)胞、組織和器官,在離體培養(yǎng)條件下,可以生長(zhǎng)和發(fā)育,形成完整植株。但是,不同種植物,或者同種植物不同品種,甚至同一植物不同組織和器官的細(xì)胞,再生能力也有差別。通常野生植物比栽培植物再生能力強(qiáng),無性繁殖的植物強(qiáng)于種子繁殖的植物。植株再生的基礎(chǔ)在于細(xì)胞具有遺傳全能性,即每一個(gè)細(xì)胞含有產(chǎn)生一個(gè)完整有機(jī)體的全部遺傳信息,在適當(dāng)?shù)臈l件下,一個(gè)具有全能性的活細(xì)胞,其發(fā)育和分化,受其DNA上面的部分基因的被活化或阻抑所控制,一個(gè)細(xì)胞可以形成一個(gè)完全新的有機(jī)體。在離體培養(yǎng)物上再生植株,是離體培養(yǎng)物的細(xì)胞在各種環(huán)境因子的刺激和作用下,經(jīng)過脫分化和再分化的結(jié)果??赡苡捎谥参锛?xì)胞分化狀況僅有相對(duì)的穩(wěn)定性,在離體培養(yǎng)中,特異化的細(xì)胞比較容易經(jīng)脫分化恢復(fù)全能性,全能性的脫分化細(xì)胞經(jīng)過再分化,產(chǎn)生完整的小植株。其中分化是植株再生的中心問題,和許多因素有關(guān)。植物激素是化學(xué)信使,作為基因表達(dá)的“效應(yīng)子”,對(duì)RNA和蛋白質(zhì)的合成起直接影響,在細(xì)胞脫分化和再分化的過程中起著重要的、有時(shí)是決定性的作用。雖然許多問題還非常不清楚,但是,植株再生的基本原理,目前認(rèn)為是:(1)植物細(xì)胞全能性;(2)植物細(xì)胞的脫分化和再分化;(3)植物激素的平衡作用。這些基本原理,既是組織培養(yǎng)的一般指導(dǎo)原則,也是一些有待于深入研究的基本理論課題。三、植株再生的基本途徑從離體培養(yǎng)物上再生植株,存在兩條形態(tài)發(fā)生的基本途徑,即器官發(fā)生和胚胎發(fā)生。這兩種形態(tài)發(fā)生,有的經(jīng)過愈傷組織階段,有的則直接產(chǎn)生于離體的母體組織。(一)器官發(fā)生器官發(fā)生途徑是通過器官分化形成完整植株,如貝母、藏紅花、紫背天葵、蘆薈。離體培養(yǎng)物的器官分化,包括不定芽、不定根、鱗莖、球莖、塊莖、原球莖以及花的形成。通過不定芽和不定根形成再生植株,有三種方式:(1)先形成芽,而后在芽上產(chǎn)生根;(2)先形成根,而后在根上產(chǎn)生芽;(3)在愈傷組織上同時(shí)產(chǎn)生芽和根,以后芽和根之間形成維管系統(tǒng),連結(jié)成統(tǒng)一的軸狀結(jié)構(gòu)。大多數(shù)情況為第一種方式。通過鱗莖、球莖、塊莖、原球莖等器官分化,也有不同情形。在植物組織培養(yǎng)中,雖然通過器官發(fā)生途徑再生植株的研究報(bào)道很多,但是有關(guān)基礎(chǔ)研究的資料仍很貧乏。大多數(shù)的研究繼續(xù)集中在外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件這三類因子調(diào)控作用的經(jīng)驗(yàn)性操作。在大多數(shù)情況下,人們僅能觀察已經(jīng)表現(xiàn)出來的分化狀態(tài),而很難跟蹤分化的過程。與形態(tài)發(fā)生的起源和方向有關(guān)的因素,目前的認(rèn)識(shí)還很模糊,在這些因素中,包括有離體培養(yǎng)體系中各類物質(zhì)的變化和相互作用,這些物質(zhì)來自培養(yǎng)基、外植體及其培養(yǎng)過程中的代謝產(chǎn)物。在離體培養(yǎng)中,只有少量的細(xì)胞被啟動(dòng),而且起始是不同步的。Torrey(1966)提出擬分生組織假說,形態(tài)發(fā)生起始于愈傷組織中形成的分生細(xì)胞團(tuán),即擬分生組織。在培養(yǎng)體系內(nèi)各種因子的作用下,由擬分生組織產(chǎn)生不同的原基,由于作用因子的性質(zhì)不同,或者形成根,或者形成芽,或者發(fā)育為胚狀體。擬分生組織可能發(fā)生于組織與培養(yǎng)基的界面,其形成部位可能決定于從培養(yǎng)基向組織擴(kuò)散的物質(zhì)造成的生理梯度。Skoog和Miller等提出激素平衡假說,認(rèn)為器官分化和細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比例有關(guān)。在大多數(shù)情況下,生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的高比值,利于根形成,而相反的比值利于芽的發(fā)生。由于外植體內(nèi)源激素的存在和抑制物質(zhì)的累積,也有不少相反的情況。在實(shí)際應(yīng)用這一原則時(shí),有時(shí)需要增加或省略某一類植物激素,對(duì)下述因素作出必要的考慮:(1)植物激素的種類和組合;(2)植物激素的絕對(duì)濃度;(3)植物激素,主要是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例;(4)植物激素的順序效應(yīng);(5)其它因素的影響,如外植體、營(yíng)養(yǎng)條件、碳源種類和濃度以及其它理化因素。(二)胚胎發(fā)生從胚胎發(fā)生途徑再生植株是先形成胚狀體,通過胚狀體萌發(fā)而形成完整的小植株。在高等植物中胚狀體的發(fā)生是一個(gè)普遍現(xiàn)象,現(xiàn)在已觀察到40多科150多種植物具有胚胎發(fā)生能力。關(guān)于胚狀體的概念,朱澂提出(1978),胚狀體是植物組織培養(yǎng)中起源于非合子細(xì)胞,經(jīng)過胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過程形成的胚狀結(jié)構(gòu)。這個(gè)定義包括下列幾點(diǎn)含義:(1)胚狀體是組織培養(yǎng)的產(chǎn)物,只限于在組織培養(yǎng)范圍內(nèi)使用,區(qū)別于無融合生殖的胚;(2)胚狀體起源于非合子細(xì)胞,區(qū)別于合子胚;(3)胚狀體的形成經(jīng)歷胚胎發(fā)育的過程,區(qū)別于組織培養(yǎng)中分化的芽體。胚狀體的來源可以分為五類:(1)組織器官;(2)愈傷組織;(3)游離單細(xì)胞;(4)小孢子;(5)原生質(zhì)體。其中有的起源于單細(xì)胞,有的起源于多細(xì)胞。胚狀體發(fā)生方式有兩種(Sharp et al,1980):(1)直接發(fā)生:胚狀體形成不經(jīng)過愈傷組織,直接來自離體培養(yǎng)組織中預(yù)決定胚性細(xì)胞(Preembryogenic determined cell);(2)間接發(fā)生:胚狀體發(fā)生經(jīng)過愈傷組織,從愈傷組織的誘導(dǎo)決定胚性細(xì)胞(Induced-embryogenic determined cell)發(fā)育而成。在培養(yǎng)體系有關(guān)因子的作用下,胚性細(xì)胞不斷分裂和增殖,形成胚性細(xì)胞團(tuán),進(jìn)而發(fā)育成球形胚。通常胚性細(xì)胞較小,核大,細(xì)胞質(zhì)濃厚,富有大的淀粉粒。球形胚組織可以與周圍組織分離,和合子胚發(fā)育過程相似,由球形胚發(fā)育分化為心形胚、魚雷形胚和具有子葉的成熟胚狀體。成熟的胚狀體形態(tài)和合子胚相似,具有胚根、胚芽和子葉。在分化培養(yǎng)基上,胚狀體像種子一樣萌發(fā),胚軸伸長(zhǎng),葉片展開,發(fā)育根和形成葉綠素,多種器官再進(jìn)一步生長(zhǎng)形成小植株。由于胚狀體的形成,導(dǎo)致了人工種子的研制。從胚狀體發(fā)生到植株形成是一個(gè)連續(xù)過程,可以分為三個(gè)連續(xù)階段:(1)胚狀體的起源;(2)胚狀體的分化;(3)胚狀體萌發(fā)生長(zhǎng),形成小植株。在實(shí)際操作中,胚性細(xì)胞的誘導(dǎo)及其形成胚狀體的發(fā)育過程,可能在同一個(gè)培養(yǎng)基上形成,或者分別需要經(jīng)過兩次培養(yǎng)。胚狀體形成綠色植株,則需要轉(zhuǎn)至分化培養(yǎng)基。如果培養(yǎng)基中的化學(xué)物質(zhì),主要是植物激素的不平衡。胚性細(xì)胞的分化和胚狀體的發(fā)育會(huì)受到抑制,而發(fā)生畸形胚性組織塊。這些畸形結(jié)構(gòu)也可能具有胚胎發(fā)生潛力。胚胎發(fā)生與植物激素的關(guān)系因植物而異,可有幾種類型:1.專一性生長(zhǎng)素型胚胎發(fā)生必須有生長(zhǎng)素存在,其它植物激素的存在起抑制作用。這種類型又有兩種情況:(1)誘導(dǎo)胚性細(xì)胞必須有生長(zhǎng)素,胚狀體形成和發(fā)育,則需要降低或者去除生長(zhǎng)素,如胡蘿卜;(2)胚狀體誘導(dǎo)和發(fā)育可在同一生長(zhǎng)素培養(yǎng)基上進(jìn)行。如人參。2.非專一性生長(zhǎng)素型胚胎發(fā)生需要生長(zhǎng)素,其它植物激素,如細(xì)胞分裂素、赤霉素或脫落酸,在一定配比下有協(xié)同作用,如酸棗。3.非生長(zhǎng)素型胚胎發(fā)生不需要生長(zhǎng)素,可在細(xì)胞分裂素培養(yǎng)基上形成,如檀香。4.非激素型胚胎發(fā)生不需要植物激素,如曼陀羅花藥培養(yǎng)。胚狀體分化綠苗,通常需要降低或去除生長(zhǎng)素,而細(xì)胞分裂素、赤霉素具有主要作用,如人參、西洋參。在體細(xì)胞胚胎發(fā)生中,還原態(tài)氮化物具有重要作用。還原態(tài)氮化物包括無機(jī)氮,如NH+4;有機(jī)氮化物,如氨基酸、酰胺、水解酪蛋白等。在通常情況下,還原態(tài)氮化物有利于胚狀體的發(fā)生,但是作用機(jī)理并不清楚,不同植物反應(yīng)也不相同。許多研究表明,生長(zhǎng)素和還原態(tài)氮化物的濃度比例可能起著重要作用。不同植物不同離體培養(yǎng)物再生植株的途徑可能不同,有的主要通過器官發(fā)生途徑,如煙草,有的很容易發(fā)生胚狀體,如胡蘿卜。但是許多植物再生植株,既可以通過器官發(fā)生途徑,也可以通過胚胎發(fā)生途徑,植物激素可以進(jìn)行調(diào)控,如人參、西洋參等。通常誘導(dǎo)芽體分化需要細(xì)胞分裂素,誘導(dǎo)胚狀體發(fā)生則生長(zhǎng)素起重要作用。在離體培養(yǎng)物上分化芽體和胚狀體,它們的主要區(qū)別在于:芽體具有單極性,與離體培養(yǎng)物有維管組織聯(lián)系,根和芽不同時(shí)產(chǎn)生;胚狀體具兩極性,即有根端(胚根)和莖端(胚芽),與離體培養(yǎng)物無直接聯(lián)系,是一個(gè)完整的植物體雛形。由于體細(xì)胞胚胎發(fā)生研究的進(jìn)展,導(dǎo)致了人工種子的研制。四、植株再生的限制因素(一)植株再生的限制因素在離體培養(yǎng)物上再生植株,可以分為外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件三類調(diào)控因子。在這三類因子中,雖然它們的作用都很重要,但是比較起來,植株再生能否成功,限制因素主要不在于培養(yǎng)基,而在于培養(yǎng)材料本身,即培養(yǎng)材料細(xì)胞全能性的表達(dá)程度。1.遺傳型(基因型)的影響不同植物種之間再生能力有很大差別,有的再生能力很強(qiáng),如茄科、傘形科、十字花科等;有的再生比較困難,如豆科植物。同一種植物不同品種再生能力也有不同。由于遺傳型的影響,決定了植株再生的難易程度和應(yīng)用前景。我們?cè)谘芯课寮涌扑幱弥参锶藚ⅰ⑽餮髤?、三七和刺五加種胚培養(yǎng)再生植株時(shí),得到下述結(jié)果:(1)在附加BA2mg/l+NAA0.5mg/l的培養(yǎng)基上,人參和西洋參種胚培養(yǎng)物可以直接啟動(dòng)芽分化,轉(zhuǎn)入含有赤霉素的培養(yǎng)基上則形成不定芽,而三七和刺五加則無芽體分化。(2)在有生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上,這四種藥用植物種胚培養(yǎng)物上均有胚狀體發(fā)生,但是對(duì)生長(zhǎng)素的種類和濃度反應(yīng)不同。在附加2,4-D0.5—1.0mg/l時(shí),胚胎發(fā)生能力依次為:西洋參>人參>刺五加,而三七未觀察到胚胎發(fā)生。在含有IAA的培養(yǎng)基上,高濃度的IAA促進(jìn)人參種胚體細(xì)胞胚胎發(fā)生,而三七和刺五加則以低濃度IAA為宜。(3)在上述的生長(zhǎng)素條件下,人參和西洋參為間接胚胎發(fā)生,而三七和刺五加為直接胚胎發(fā)生。2.外植體的來源在離體培養(yǎng)中,可用作培養(yǎng)的材料很多,包括器官、組織,甚至單細(xì)胞。雖然植物細(xì)胞具有全能性,但它的表達(dá)可能僅限于某些特殊的細(xì)胞,這些細(xì)胞可能預(yù)先存在于外植體中,或者產(chǎn)生于培養(yǎng)過程之中。許多實(shí)驗(yàn)表明,培養(yǎng)材料的特性,不僅影響再生的可能性,而且影響植株增長(zhǎng)速率和植株的品質(zhì)。在選用培養(yǎng)材料時(shí)可以觀察到,分生組織易于分化,子葉基部再生較強(qiáng),成年樹木的葉片,可能逆轉(zhuǎn)性較差,細(xì)胞全能性難以表達(dá)。我們?cè)谘芯课餮髤㈦x體培養(yǎng)再生植株時(shí),不同外植體來源的愈傷組織,細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同(表13—10)。表13—10 西洋參不同外植體愈傷組織細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度3.外植體的狀況外植體的發(fā)育階段和年齡,外植體內(nèi)源激素和生理狀態(tài)(取材季節(jié)),外植體大小,外植體的預(yù)處理,以及母體植株的質(zhì)量等均影響植株再生的能否成功。在選擇外植體時(shí),需要了解植物的生物學(xué)特性。(二)外植體的種類和選用在離體培養(yǎng)中,可供外植體的材料多種多樣,可以根據(jù)研究目的、再生途徑和實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行選用。1.帶芽的外植體包括莖頭、側(cè)芽、原球莖、鱗莖等,這類外植體產(chǎn)生的植株成功率較高,變異性較小,容易保持材料的優(yōu)良特性,通常用于快速繁殖和培養(yǎng)無病毒植株(莖尖培養(yǎng))。在培養(yǎng)時(shí),為了誘導(dǎo)莖軸伸長(zhǎng),在培養(yǎng)基中多附加有生長(zhǎng)素和赤霉素;如果誘導(dǎo)腋芽生長(zhǎng)以產(chǎn)生叢生芽,在培養(yǎng)基中常含有大量的細(xì)胞分裂素。2.由分化的組織構(gòu)成的外植體包括莖段、葉片、根等營(yíng)養(yǎng)器官;花莖、花瓣、花萼、花藥、子房,胚珠、果實(shí)等生殖器官。這類外植體在培養(yǎng)過程中通常形成愈傷組織,通過器官發(fā)生和胚胎發(fā)生途徑再生植株。通過器官發(fā)生途徑再生植株,通常選用在自然條件下能產(chǎn)生不定芽的器官組織,這要根據(jù)不同植物的特性加以選擇,例如蘆薈選用莖段,菊花選用花瓣,百合選用鱗片等。通過胚胎發(fā)生途徑,常選用胚、幼嫩花序、分生組織等作外植體。這類外植體再生植株變異性較大,可用于無性系變異和突變體篩選,或者用于單倍體育種,如花粉植株。3.由遺傳轉(zhuǎn)化的細(xì)胞構(gòu)成的外植體主要是指冠癭瘤轉(zhuǎn)化系統(tǒng)和直接DNA轉(zhuǎn)化系統(tǒng),用于植物遺傳工程。五、再生植株的培養(yǎng)方法(一)再生植株的培養(yǎng)步驟1.建立無菌培養(yǎng)物這一步驟包括選取外植體,材料表面滅菌和在培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)。能否得到無菌培養(yǎng)物,首先決定于植物材料的狀況,應(yīng)盡可能使用在培養(yǎng)室或溫室栽種的生長(zhǎng)健康旺盛的材料。田間材料滅菌比較困難,常采用下述方法:(1)用抗菌素溶液和殺菌劑預(yù)處理植株;(2)用塑料袋包裹枝條;(3)采回枝條扦插,利用新生的芽;(4)對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行多次滅菌。有一些植物的外植體在接種后和培養(yǎng)過程中發(fā)生褐變,可以選用一些抗氧化劑、解毒劑或吸附劑加入到培養(yǎng)基中,如檸檬酸、抗壞血酸,及半胱氨酸、聚乙烯吡咯烷酮、二硫蘇糖醇、促長(zhǎng)啉、氯胺丁、二乙基二硫代氨基甲酸酯、活性炭等,以改善褐變情況。2.愈傷組織的培養(yǎng)愈傷組織是植物組織培養(yǎng)中最常遇到的一個(gè)階段,為了快速繁殖遺傳性一致的優(yōu)良株系,使變異小于3%,需要盡量避免愈傷組織,然而在品種改良方面,誘導(dǎo)愈傷組織是有益的。愈傷組織通常產(chǎn)生于外植體傷口的表層細(xì)胞。愈傷組織的生長(zhǎng)特性取決于植物材料、培養(yǎng)基和環(huán)境條件,從外植體到愈傷組織建立,大體上經(jīng)歷誘導(dǎo)、細(xì)胞分裂和分化階段。在外界條件尤其是植物激素的作用下,少數(shù)細(xì)胞被啟動(dòng),新陳代謝加強(qiáng),而進(jìn)入活躍的細(xì)胞分裂,外植體細(xì)胞逆轉(zhuǎn)為分生組織,或脫分化為愈傷組織。愈傷組織的生長(zhǎng)沒有明顯的極性,只有內(nèi)外的生長(zhǎng)陡度,外圍的細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)快于內(nèi)部細(xì)胞。第三個(gè)時(shí)期,愈傷組織出現(xiàn)細(xì)胞分化和產(chǎn)生某些次生代謝產(chǎn)物。愈傷組織最重要的特征是可以通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生形成根、芽和胚狀體,進(jìn)而形成小植株。愈傷組織通常表現(xiàn)為淡黃色、白色、綠色,有的含有花色素苷形成的顏色。愈傷組織有松散型和緊密型。同一來源的愈傷組織,在繼代培養(yǎng)中經(jīng)過人工篩選,可以得到不同的細(xì)胞系,它們?cè)诩?xì)胞分化程度、顏色、生長(zhǎng)速度、對(duì)營(yíng)養(yǎng)條件和激素條件的要求、合成特殊物質(zhì)的能力等方面有很大的差異。變異是愈傷組織另一個(gè)重要特征。這些變異有表現(xiàn)型變異和基因型變異?;蛐妥儺惪赡苡斜缎宰兓旧w畸變、基因序列變化。通過對(duì)有益變異的選擇可以用于品種改良。從外植體形成愈傷組織,與植物激素的關(guān)系大致有下述情況:(1)僅需要生長(zhǎng)素;(2)僅需要細(xì)胞分裂素;(3)需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素;(4)不需要植物激素。在大多數(shù)情況下,生長(zhǎng)素是誘導(dǎo)愈傷組織的主要因子。在培養(yǎng)過程中,由于營(yíng)養(yǎng)逐漸耗盡,瓊脂失水逐漸變干,代謝產(chǎn)物累積而使毒性提高,愈傷組織培養(yǎng)一段時(shí)間需要轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng),在固體培養(yǎng)基上,一般4—6周繼代培養(yǎng)一次。轉(zhuǎn)移的培養(yǎng)體,大約5—10mm,重20—100mg左右(Street,1969)。體積太小可能生長(zhǎng)很慢,或者不生長(zhǎng),但是在進(jìn)行抗性篩選時(shí),培養(yǎng)體體積要小些。愈傷組織繼代培養(yǎng)基和脫分化培養(yǎng)基的成分和激素條件,可能相同,也可能不同,因植物而異。由于長(zhǎng)期繼代培養(yǎng)使內(nèi)源激素含量增加,繼代培養(yǎng)基的激素種類和含量需要作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。3.無性系的建立從離體培養(yǎng)物上建立無性系,經(jīng)常遇到變異、細(xì)胞分化能力喪失和出現(xiàn)玻璃苗等問題。對(duì)每一種植物的離體培養(yǎng),需要通過大量的試驗(yàn),確定最佳培養(yǎng)條件,使之程序化,以便達(dá)到應(yīng)用目的。建立無性系的途徑大致可用圖13—2表示。圖13—2 無性系建立示意圖4.生根從芽和嫩枝誘導(dǎo)生根的難易程度首先取決于植物的遺傳型。草本植物一般比木本植物容易。成年樹產(chǎn)生的芽和嫩枝,比幼態(tài)樹的生根困難。誘導(dǎo)生根通常在生根培養(yǎng)基上加入適量的生長(zhǎng)素,如萘乙酸、吲哚丁酸、吲哚乙酸。有些植物可以在無激素培養(yǎng)基上生根。生根培養(yǎng)基可以和前培養(yǎng)基相同,也經(jīng)常使用1/2、1/3或1/4濃度的高鹽培養(yǎng)基,或者總鹽濃度較低的培養(yǎng)基。鐵鹽有益于根的形成,一般維持原濃度。蔗糖對(duì)于生根是必要的,不同的植物需要量可能不同。一些難以生根的植物可以試用一些其它的方法:(1)用高濃度生長(zhǎng)素溶液預(yù)處理若干小時(shí),而后用無菌水洗凈接入無激素培養(yǎng)基;(2)使用濾紙橋或蛭石代替瓊脂作支持物誘導(dǎo)生根;(3)在生根培養(yǎng)基上添加一些附加物,如活性炭、B9、二甲亞砜、根皮苷、根皮酚等物質(zhì);(4)在試管中誘導(dǎo)休眠器官,如小塊莖、小球莖、地下莖等;(5)切割嫩枝直接進(jìn)行扦插或水培等。5.移栽有的植物移栽比較容易,例如:蘆薈試管苗直接移入土中,成活率可達(dá)100%,而人參試管苗移栽目前尚未見有成功的報(bào)道。對(duì)于許多植物需要具體研究其特殊的移栽技術(shù)。(1)培養(yǎng)壯苗,移栽前進(jìn)行鍛煉。(2)逐步過渡,先經(jīng)過人工基質(zhì),如蛭石、砂粒、珍珠巖、焦渣、心土等,而后移入土壤。對(duì)于易感病的植物,人工基質(zhì)可采用高溫滅菌、化學(xué)滅菌或藥劑滅菌。(3)選擇合適的移栽時(shí)期。許多木本植物和一部分草本植物,當(dāng)根原基突起或形成幾毫米短根時(shí)移栽成活率最高。有的草本植物可進(jìn)行二次生根誘導(dǎo),在第一次生根老化后再誘導(dǎo)新根進(jìn)行移栽。(4)控制移栽環(huán)境條件,保持高濕度和良好通風(fēng),避免陽(yáng)光直射和溫度過大波動(dòng)。有些植物需要模擬其生態(tài)環(huán)境。(5)病害及時(shí)防治。常見為立枯病,可用多菌靈等農(nóng)藥對(duì)幼苗和基質(zhì)進(jìn)行定期噴灑。(6)進(jìn)行試管苗嫁接。(二)培養(yǎng)基和環(huán)境條件1.培養(yǎng)基根據(jù)培養(yǎng)材料和培養(yǎng)目的,植物組織培養(yǎng)可以分為許多種類,如器官培養(yǎng),莖尖培養(yǎng),花藥和花粉培養(yǎng),子房和胚珠培養(yǎng),胚胎培養(yǎng),胚乳培養(yǎng),果實(shí)培養(yǎng),細(xì)胞懸浮培養(yǎng),分生組織培養(yǎng),愈傷組織培養(yǎng),原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞融合等。不同植物不同種類的組織培養(yǎng)需要選用不同的培養(yǎng)基。目前可供植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基約有250余種。對(duì)于一般的試管繁殖,為了降低生產(chǎn)成本,有的采用簡(jiǎn)化培養(yǎng)基,用食用糖代替試劑用蔗糖,用普通水代替蒸餾水配制培養(yǎng)基。靜置淺層液體培養(yǎng)比瓊脂固體培養(yǎng)可降低成本70—80%,目前已用于一些植物的快速繁殖。2.環(huán)境條件包括培養(yǎng)基酸堿度,培養(yǎng)溫度、光照條件和通氣條件等。一般植物組織生長(zhǎng)的最適pH在5—6.5之間,固體培養(yǎng)基常用pH5.8,液體培養(yǎng)基常用pH5.0。培養(yǎng)溫度一般為20—28℃左右。高溫(大約為27℃)適合于熱帶品種,低溫(20℃左右)有利于高山植物的離體培養(yǎng)。在試管內(nèi)形成鱗莖球莖、塊莖等休眠器官時(shí),其萌發(fā)常需要低溫處理。愈傷組織培養(yǎng)一般可在暗中進(jìn)行。對(duì)于光自養(yǎng)離體培養(yǎng)物培養(yǎng)、器官發(fā)育和植株形成需要光照。光照強(qiáng)度范圍300—10000lx,一般1000—3000lx。一般培養(yǎng)室可設(shè)計(jì)用自然光代替日光燈。一些研究表明,不同波長(zhǎng)的彩色光對(duì)愈傷組織的建成和器官的分化表現(xiàn)一定的影響,而且隨植物種類和器官不同而異。光照時(shí)間因植物特性和實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ蛇B續(xù)光照,或周期性光照10—16小時(shí)。塊莖和其它貯藏器官的形成可能需要較長(zhǎng)的黑暗時(shí)期。研究花器官發(fā)生時(shí)需要根據(jù)植物特性控制光照時(shí)間。在固體培養(yǎng)基上通??梢圆豢紤]空氣成分,雖然在培養(yǎng)過程中有乙烯產(chǎn)生。液體培養(yǎng)需要注意通氣。細(xì)胞懸浮培養(yǎng)一般采用振蕩法通氣。在器官分化時(shí),可用轉(zhuǎn)床,使組織能間隔在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。小體積的靜置淺層液體培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間需要縮短,大約四周繼代培養(yǎng)一次。為了保存繁殖材料,仍應(yīng)采用固體培養(yǎng)。六、我國(guó)藥用植物離體培養(yǎng)再生植株研究概況在藥用植物栽培生產(chǎn)中,不少名貴藥用植物生長(zhǎng)周期長(zhǎng),用常規(guī)育種需要很長(zhǎng)時(shí)間,如人參、黃連等。有的藥用植物繁殖系數(shù)小,耗種量大,如貝母、番紅花等。有的因病毒為害而退化,影響產(chǎn)量和質(zhì)量,如地黃、太子參等。一些價(jià)格昂貴的野生藥用植物資源極少,生長(zhǎng)緩慢,如黑節(jié)草、霍山石斛等。一些進(jìn)口南藥因種苗奇缺而影響擴(kuò)大生產(chǎn),如乳香、血竭等。為了應(yīng)用植物生物技術(shù)對(duì)藥用植物進(jìn)行品種改良、快速繁殖、種質(zhì)保存和開展遺傳工程研究,藥用植物離體培養(yǎng)再生植株的研究和應(yīng)用日益引起人們的興趣和重視。目前,離體培養(yǎng)的試管藥用植物已達(dá)百種以上,如:爵床科九頭獅子草(Peristrophe japonica),獼猴桃科中華獼猴桃(Actinidia chinensis)、中華獼猴變種(A.chinensis var.sp.)、硬毛獼猴桃(A.chinensis var.hispide)夾竹桃科長(zhǎng)春花(Catharanthus roseus)、夾竹桃(Nerium indicum)、蛇根木(Rauwolfia serpertina),五加科刺五加(Acanthopanax senticosus)、人參(Panax ginseng)、竹節(jié)參(P.japonicus)、西洋參(P.quinquefolium)、三七(P.notoginseng),蘿摩科馬利筋(Asclepias curassavica)、印度娃兒藤(
5,歪棗怎樣育苗
他一般是把棗糊洗干凈之后,放在專用的育苗室中進(jìn)行育苗,必須要浸泡一段時(shí)間,它才可以順利發(fā)芽的。需要越南的毛葉棗種子才能育苗,再嫁接蜜絲棗上去,我今年自己育有兩三千棵種苗,同時(shí)我也有十畝蜜絲棗成年樹,現(xiàn)在果子已經(jīng)上市了。
6,軟棗苗生活習(xí)性
嫁接時(shí)間:獼猴桃的最佳嫁接期在6~7月,過早、過晚成活率都較低。嫁接方法:可采用插皮舌接、劈接、腹接、芽接等方法,以芽接和插皮舌接成活率為最高。嫁接后的管理。接芽萌發(fā)新葉展開后,在接口10厘米以上處剪砧。過早剪砧則砧木上易抽生新條影響接芽的發(fā)育。嫁接較遲的,可待來年春季發(fā)芽后剪砧,接芽萌發(fā)抽生枝條后,應(yīng)設(shè)立支柱綁縛,以免折斷。1、芽接:在6月上旬至9月上旬均可進(jìn)行。芽接時(shí),選健壯的實(shí)生苗做砧木,用“t”字接法。先在接穗上選取飽滿的芽,削成盾形芽片。再在選好的砧木上離地面5厘米處劃一個(gè)“t”字形,將皮挑開,把盾形芽片插入,最后用塑料膜條縛緊,露出芽頭。一個(gè)月后若芽片仍是綠色,說明木質(zhì)部已連接在一起,嫁接成功。這時(shí)剪去砧木上部,加強(qiáng)肥水管理,當(dāng)年新芽可抽條,翌年便可成為商品苗。花期5~6月,果期9月。我國(guó)特產(chǎn),主產(chǎn)黃河流域沖積平原,全國(guó)各地均有栽培。為我國(guó)主要果樹和木本糧食樹種。已有兩千年栽培歷史。果味甜,富含維生素C,可生食,又可制蜜餞和果脯,釀酒。果入藥能補(bǔ)脾胃、潤(rùn)心肺、益氣養(yǎng)榮。木材堅(jiān)硬致密,為制器具和雕刻用材?;ㄆ陂L(zhǎng),為優(yōu)良蜜源樹。其變種酸棗(var.spinosa)和棗的區(qū)別為:灌木或小喬木,核果小圓球形,果核亦近圓球形。喜光,適應(yīng)性強(qiáng),喜干冷氣候,也耐濕熱,對(duì)土壤要求不嚴(yán),耐干旱瘠薄,也耐低濕。生長(zhǎng)于海拔1700米以下的山區(qū)、丘陵或平原。棗樹長(zhǎng)著小刺,四月里長(zhǎng)葉,五月開白帶青的花,各處都有栽種。
7,有棗樹快速育苗的方法嗎
為了快速繁育優(yōu)質(zhì)棗樹壯苗,當(dāng)年播種當(dāng)年嫁接、當(dāng)年成苗的棗樹快速育苗技術(shù)。介紹如下: 1 整地作床 (1) 整地:秋冬季深翻育苗地30厘米,結(jié)合深翻每畝施入腐熟農(nóng)家肥10米3和磷肥100公斤,放置待用。 (2) 作床:翌年2月中下旬,再淺耕育苗地一遍,每畝施入碳酸氫銨l00公斤,耙平。育苗采用高壟作業(yè),壟高10厘米,寬50厘米;壟的長(zhǎng)度原則上要便于作業(yè),壟作好后,覆蓋地膜。 2 播種及砧木苗管理 (1) 播種:在整好的壟上,用利器刺破地膜,點(diǎn)播經(jīng)過脫殼處理的酸棗仁,株行距15×(30~50)厘米,株距15厘米,壟上行距30厘米,壟間行距50厘米,每穴2~3粒,澆上水,然后用細(xì)土封穴。 (2) 砧木苗管理:及時(shí)除草和根據(jù)墑情澆水,結(jié)合澆水追施氮肥3~4次。 3 嫁接 嫁接一般在6~8月份進(jìn)行,凡砧木粗度與接穗粗度相當(dāng)即可嫁接,具體時(shí)間可根據(jù)實(shí)際情況分別對(duì)待,早接成活率高,利于培養(yǎng)壯苗。嫁接刀具是單面刀片,綁扎條用厚地膜。嫁接方法是頂端嫩枝嫁接法,即采用幼嫩的棗頭枝作接穗,在砧木上的幼嫩部位去頂后,縱切一刀,插入接穗。接穗剪取以一個(gè)接芽為宜,具體操作方法同春季劈接。綁條要綁緊下部接口,除葉柄外包嚴(yán)全部接穗。 4 接后管理 (1) 除萌:及時(shí)抹除砧木的萌芽,以減少水分、養(yǎng)分消耗和利于砧穗愈合。 (2) 解條:待接芽長(zhǎng)到10厘米時(shí),解除接口包扎物。 (3) 肥水管理:當(dāng)接芽大部分萌發(fā)后,及時(shí)澆水、追肥。前期以氮肥為主,后期追施磷鉀肥。 總之,采用嫩枝頂端嫁接的方法繁育棗苗,較常規(guī)方法縮短了棗樹青苗周期,降低了生產(chǎn)成本,只要加強(qiáng)生產(chǎn)管理,就可實(shí)現(xiàn)當(dāng)年播種、當(dāng)年嫁接、當(dāng)年成苗出圃我在扶農(nóng)網(wǎng)上看到有介紹的,可以看看哦
8,臺(tái)灣大青棗苗一般是怎么育苗出來的
臺(tái)灣青棗現(xiàn)在在廣西還是蠻多人種植的,臺(tái)灣大青棗苗生長(zhǎng)速度快,當(dāng)年種植當(dāng)年掛果,即使到了7-8月份種植,當(dāng)年仍可掛果,經(jīng)濟(jì)效益還是不錯(cuò)的。不過在種植選種上,如果你覺得麻煩直接青棗苗批發(fā)來種植,青棗苗批發(fā)不放心你就自己育苗來種也不錯(cuò),大青棗苗育苗方法如下:一、砧木培育 1、種子處理 選取當(dāng)年充分成熟的野生種子,在播前用撲菌特(中日合資生產(chǎn))1000倍液或70%甲基托布津1200倍液浸泡24小時(shí)后涼干備用。 2、整地播種 選擇土質(zhì)疏松的園地耕翻整畦,畦面應(yīng)整平整細(xì),用水噴濕畦面,撒播種子須均勻(每1kg種子約1500粒,可播2㎡),播種后覆蓋1-1.5cm厚的細(xì)土,最后蓋上地膜,以促進(jìn)萌芽和提高發(fā)芽率。夏季播種應(yīng)地膜上加蓋一層稻草,待萌芽后及時(shí)掀開地膜通風(fēng),以免造成爛種爛芽。 3、適期移植 播種后2-3個(gè)月小苗有2-3片真葉時(shí)移栽成活率最高,小苗株行距應(yīng)大于15cm。移栽后需遮蔭3-4天,保持土壤濕潤(rùn),如果是假植于營(yíng)養(yǎng)袋的,營(yíng)養(yǎng)袋周邊間隙要填土保濕。臺(tái)灣大青棗苗培育方法如下:種植時(shí)間以3-5月最適宜,視天氣而定。有水源的地方,全年都可種植。(一)植間距大青棗生長(zhǎng)迅速,植株壽命長(zhǎng)且多利用側(cè)枝斜生,樹冠面積大,定植距離以6米以上較佳,一般行株距6×5米。栽植太密,浪費(fèi)種苗成本,田間作業(yè)困難。(二)栽植方法種植植穴直徑60-100厘米寬深,以腐熟堆肥20-30公斤加復(fù)合肥0.5公斤、鈣鎂磷肥0.5公斤、硫酸鎂0.2公斤,硼肥0.025公斤,小量生石灰與表土混合填滿踏實(shí),然后定植壓緊,幼苗基部周圍做20公分淺盆狀,便利灌水,必要時(shí)基部包覆稻草,以防烈日蒸曬。做好排水,以免淹水,立支柱固定幼苗,避免風(fēng)吹松動(dòng),影響生長(zhǎng)。
9,棗樹可以種植嗎
看你是什么地方的,如果雨水多的地區(qū)是不能栽大棗的,棗樹的吸水能力特別強(qiáng),雨水多,棗樹生長(zhǎng)旺盛,抗寒能力低,另外枝干吸收過多的水,會(huì)將表皮掙裂而導(dǎo)致樹體死亡.另外,東北地區(qū)只有在朝陽(yáng)地區(qū)和阜新地區(qū)才適合發(fā)展棗樹,再往北就不太適合了,北部地區(qū)栽的棗樹,即使不被凍死,但冬季氣溫過低,樹干勉強(qiáng)過冬,也不能開花結(jié)果.一、斷根育苗 早春化凍后,選擇品種好的棗樹作母樹,在其周圍挖溝斷根,距樹干2米左右,挖一道深、寬各30厘米左右的環(huán)狀溝,將生土熟土分開,邊挖邊切斷樹根,遇有直徑6厘米以上的根不要切斷,切斷后會(huì)傷害母樹,又不易起苗。挖好溝后,首先向溝內(nèi)混施部分土雜肥,而后澆水,待水滲完填入熟土、生土。五月中旬以后,一個(gè)斷根上可抽出數(shù)條分蘗,幼苗長(zhǎng)到35厘米左右時(shí),選留1—2根健壯苗,其余剪掉。另在溝外35厘米的地方再挖第二道溝,可促使幼苗生根。移栽前要定期澆水、施肥、除草、滅蟲治病。兩年后樹苗可移植,移植時(shí)帶一段25厘米左右的母樹根,提高成活率。 二、歸圃育苗 選擇土質(zhì)肥沃,能排能灌的地塊作苗圃,把當(dāng)年自然生長(zhǎng)的根蘗苗、斷根培育的苗,按合理的密度移植到苗圃,集中培育。這樣便于管理,產(chǎn)苗量多,苗木側(cè)根較多,移栽成活率高?! ∪?、嫁接育苗 一般在4月中旬至5月中旬,把品種優(yōu)良的棗樹芽條接在酸棗樹苗上。嫁接的方法有劈接、嫩梢芽接、硬枝芽接、插皮接等方法?! ∷?、種子育苗 從品質(zhì)好的棗樹中篩選出有棗仁的棗核取出棗仁,放在25℃的溫水中浸泡一晝夜,撈出放在筐里,用濕布蒙蓋,種子的溫度保持在24℃左右,每天用25℃的溫水沖4次,3天后大部分發(fā)芽,第4天即可播種。育苗地要施足底肥,深耕細(xì)耙,開成深10厘米的溝,行距65厘米,溝內(nèi)合理灌水,水滲完點(diǎn)播,株距20厘米,每穴放種3—4粒,然后用細(xì)土覆蓋將溝平好,并培成一個(gè)寬15厘米、高10厘米的小土堆,5日后平去土堆,一周后幼苗拱出地面。第三年春季即可移栽。 五、克隆育苗 克隆育苗是運(yùn)用生物工程的系統(tǒng)技術(shù)培育樹苗的一種新方法,是延安大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院經(jīng)過幾年的研究和實(shí)驗(yàn)并獲得成功的一種先進(jìn)育苗法,并在產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。該方法是以棗樹的莖段、莖尖為材料,通過熱脫毒和試管克隆相結(jié)合生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)棗樹苗。2003年該方法培育的20多萬株棗苗,在陜北和山東省的十多個(gè)地區(qū)試栽,經(jīng)過跟蹤調(diào)查表明移栽成活率高,長(zhǎng)勢(shì)喜人。克隆棗樹目前已在延川、延長(zhǎng)、黃陵等縣產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中推廣應(yīng)用,其育苗技術(shù)水平國(guó)際領(lǐng)先。
10,沙棗樹苗的種植
沙棗苗木既耐寒、耐旱, 又較耐鹽堿, 是新疆各地實(shí)施退耕還林、三北防護(hù)林、防沙治沙等林業(yè)重點(diǎn)工程的造林先鋒樹種, 每年需苗量很大?,F(xiàn)根據(jù)多年的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn), 總結(jié)出沙棗苗木繁育關(guān)鍵技術(shù)。
1 圃地選擇
選擇土層深厚、地勢(shì)平坦、背風(fēng)向陽(yáng)、排灌配套、交通便利、地下水位在0.5m 以下、土壤有機(jī)質(zhì)1%以上、含鹽量0.8%以下的壤土或沙壤土作為圃地。
2 整地
耕翻前每667m2 撒施優(yōu)質(zhì)有機(jī)肥3~4m3。耕深28~30cm, 積雪薄的地區(qū)必須進(jìn)行冬灌。春季解凍后, 采用機(jī)力或人工耙地, 而后作畦。苗床寬3m, 長(zhǎng)15~20m, 埂底寬0.5m, 埂頂寬0.2m, 床面達(dá)到“細(xì)、碎、凈、平、齊、松、墑”7 字標(biāo)準(zhǔn)。
苗期
在苗高15cm 以前, 原則上不灌水, 以中耕松土
蹲苗為主。苗期灌水易導(dǎo)致猝倒病的發(fā)生, 不灌水可
起到蹲苗的作用。苗期一般中耕松土2~3 次。
5.2 生長(zhǎng)期
5.2.1 追肥
當(dāng)幼苗高度達(dá)到10~15cm, 在行間開溝追施磷
酸二銨20kg/667m2 和尿素10kg/667m2, 將其拌勻撒
施溝內(nèi), 立即覆蓋并用腳踏實(shí)。第2 次追肥在封垅前
進(jìn)行, 可追施尿素8~10kg/667m2。每次施肥后立即灌
水。此外, 為了促使植株健壯生長(zhǎng), 整個(gè)生長(zhǎng)期可結(jié)
合用藥進(jìn)行根外追肥2~3 次, 即每次噴農(nóng)藥時(shí)加入
0.2%~0.4%磷酸二氫鉀100~150g/667m2。
5.2.2 灌水
第1 水在追肥后進(jìn)行, 南疆在5 月上、中旬; 北
疆在6 月1 日前后澆第1 水, 以后可每隔15~25d
澆1 次水。為了增強(qiáng)苗木抵強(qiáng)抗力, 南疆8 月20 日
左右、北疆8 月10 日左右灌1 次水, 在這之后50~
60d 內(nèi)原則上停止?jié)菜? 以鍛煉苗木。
5.2.3 間苗
為了培育優(yōu)質(zhì)苗木, 子葉期就應(yīng)開始間苗, 至苗
高2~3cm 時(shí)結(jié)束間苗。間苗后保持苗帶寬7~10cm,
苗間距2~3cm。
5.2.4 定苗
當(dāng)苗高5~6cm 時(shí)應(yīng)及時(shí)定苗, 定苗后苗間距4~
5cm。定苗應(yīng)遵循去弱留強(qiáng)、去密留稀、去病蟲苗留
健壯苗的原則。通過間苗、定苗, 每667m2 保苗株數(shù)
在3.5 萬~4.0 萬株之間。
5.2.5 中耕鋤草
中耕鋤草多在前期進(jìn)行, 一般每年3~5 次。
5.2.6 病蟲害防治
危害沙棗苗的主要病蟲害有: 猝倒病、銹病、霉
污病等。( 1) 猝倒病: 主要危害幼苗。防治方法: 用
30%瑞苗清水劑進(jìn)行床土消毒; 用75%敵克松可濕
性粉劑拌種; 發(fā)病初期噴施20%龍克菌懸浮劑500
倍液或根病清1 500~2 000 倍液;( 2) 銹病: 多在苗
中、后期發(fā)生。防治方法: 發(fā)病初期( 有中心病株出
現(xiàn)) , 立即噴施15%粉銹寧可濕性粉劑800~1 000 倍
液, 或75%百菌清可濕性粉劑500~600 倍液, 7~10d
噴施1 次, 連噴2~3 次;( 3) 霉污病: 植株莖、葉布滿
霉粉狀物。防治方法: 霉污病菌是一種寄生菌, 依靠
蚜蟲、紅蜘蛛的排泄物而生活。防治蚜蟲可噴施
10%砒蟲靈可濕性粉劑2 500 倍液; 防治紅蜘蛛可
噴施100%石蠟油800~1 000 倍液。
5.2.7 修剪
田間苗木生長(zhǎng)過稀處, 因營(yíng)養(yǎng)豐富, 植株生長(zhǎng)較
壯, 中、下部枝條多且粗壯, 影響打捆運(yùn)輸。生長(zhǎng)中、
末期應(yīng)把這些枝條剪除, 以利通風(fēng)透光。
6 苗木出圃
為保證起苗根系質(zhì)量并提高起苗工作效率, 必
須澆透“起苗水”。起苗采用雙側(cè)起苗法: 先用鐵鍬
在株行的一側(cè)切挖, 再挖另一側(cè), 然后用腳將苗按同
方向踩倒后拾苗成堆。苗木規(guī)格要達(dá)到主根長(zhǎng)20cm
以上、側(cè)根長(zhǎng)15~20cm。
6.1 分級(jí)打捆
把苗木按要求分級(jí)后, 每100 株打捆, 剔除病蟲
株、干枯株和等外株, 打捆一定要緊實(shí)。
6.2 隨時(shí)假植
起苗打捆后要進(jìn)行假植, 假植坑應(yīng)挖在便于裝
車外運(yùn)處。假植坑的規(guī)格為: 深0.6~0.8m, 寬2~3m,
長(zhǎng)度不限。假植時(shí), 捆斜放, 根向下, 每碼1 層培1 層
濕土, 培土高度為株高的1/2 或2/3, 嚴(yán)防根系失水。
6.3 越冬假植
如果沙棗苗木秋季不種植, 必須進(jìn)行越冬假植。
應(yīng)注意以下3 點(diǎn):( 1) 在假植坑內(nèi)一定要投放鼠藥;
( 2) 培土方法同隨時(shí)假植, 但培土應(yīng)厚一些, 上方還
要用黑塑料薄膜覆蓋, 以防水分散失, 中間須豎葦把
通風(fēng);( 3) 來年苗木出坑后, 若發(fā)現(xiàn)根系有發(fā)霉現(xiàn)象,
必須對(duì)根系進(jìn)行消毒。生活史及習(xí)性 年生1代,以成蟲在落葉、雜草、樹皮縫及樹干上枯卷葉內(nèi)越冬。翌年3月氣溫達(dá)6℃時(shí)開始活動(dòng)。4月上旬至6月上旬交配產(chǎn)卵,交配產(chǎn)卵多在早晨和傍晚,萌芽期卵各產(chǎn)于芽上,數(shù)粒在一起,展葉后多產(chǎn)于葉背,卵一端插入葉肉內(nèi)。5月上旬開始孵化,下旬為盛期。若蟲期45~50天,5齡若蟲為害最重,蟲口密度大時(shí),排出的蜜露使枝葉發(fā)亮。6月中至7月羽化。成蟲壽命長(zhǎng)達(dá)一年左右,白天群集葉背為害,至10月下旬氣溫達(dá)0℃以下時(shí),始進(jìn)入越冬。天敵有花蝽、瓢蟲、草蛉、薊馬等。